Indholdsfortegnelse Forrige afsnit Næste afsnit Instituttets årsberetning - publikationsliste - forbrug

BIOFYSISK INSTITUT

Na,K-ATPasens struktur, funktion og regulering: Flemming Cornelius, Mikael Esmann, Natalya U. Fedosova, Irena Klodos: Det molekylære grundlag for den aktive transport af Na ⁺ og K ⁺ over plasmacellemembranen undersøges med Na,K-ATPase præparationer oprenset fra svinenyrer og saltkirtler fra pighaj. I rekonstituerede, vesikulære systemer undersøges enzymets elektrogene egenskaber under koblingen af iontransporten til ATP-hydrolysen, protein-lipid vekselvirkningen samt reguleringen af enzymet på det molekylære plan via protein kinaser. Enzymets kinetiske egenskaber (hydrolyse, ionaktivering, effekt af lokale potentialændringer) undersøges med fluorescerende markører for Na,K-ATPasens proteinkonformationer, og reaktionshastigheder bestemmes med quench-flow og rapid-mixing stopped-flow metoder. Disse egenskaber hos membran-bundet enzym sammenlignes med forholdene for Na,K-ATPase i aktiv, detergens-opløst tilstand. Strukturelle undersøgelser af membran-bundet enzym foretages med sekvensspecifikke antistoffer og kontrolleret proteolyse af proteinerne. Nukleotid-, ouabain- og kationbindingsstedernes rumlige struktur undersøges med fluorescens- og kernemagnetisk resonans (NMR) spektroskopi.

Den sarcoplasmiske reticulum Ca-ATPases struktur og funktion : Birte Stæhr Juul, Jesper Vuust Møller: Dette Ca ²⁺ -transporterende protein undersøges på isolerede sarcoplasmiske reticulum vesikler, membran- og detergenssolubiliserede Ca-ATPase præparationer samt efter rekonstitution med fosfolipid. Formålet er at belyse strukturelle forhold af betydning for Ca ²⁺ -ATPasens transportfunktion (membranfoldning, Ca ²⁺ -bindingsstedernes egenskaber samt translokations- og transduktionsmekanismen, dette gøres blandt andet ved hjælp af proteolytiske og immunologiske metoder med sekvensspecifikke antistoffer samt på syntetisk fremstillede peptider svarende til transmembrane segmenter og loops. I forbindelse hermed udforskes anvendelsen af detergenser til undersøgelse af membranproteiners struktur og funktion.

H,K-ATPasens funktion: Irena Klodos, Natalya U. Fedosova: Dette enzym, der er ansvarlig for produktionen af mavesyre, undersøges i isolerede vesikler og i membranpræparater. Formålet er at karakterisere de elektrogene trin i reaktionsmekanismen. Fluorescerende, potentiale-følsomme farvestoffer, der responderer på ændringer i nettoladningen af membranbundne proteiner, bruges til at undersøge ændringer i H,K-ATPasens nettoladning forårsaget af binding og frigørelse af kationer.

E-type ATPaser (Ecto-ATP(D)aser), struktur og funktion: Liselotte Plesner: Det antages, at disse enzymer regulerer de ekstracellulære nukleotiders koncentration omkring specifikke receptorer, purinoreceptorerne. Det vaskulære enzyms aktivitet karakteriseres i intakte kar samt efter oprensning, og dets struktur belyses med immunologiske teknikker og kemisk modifikation.

I forbindelse med instituttets forskning inden for P-type ATPaser skal nævnes, at initiativtageren til oprettelsen af Biofysisk Institut i 1968, professor emeritus, dr. med. Jens Chr. Skou fik tildelt Nobelprisen i Kemi for 1997 sammen med Paul D. Boyer, Los Angeles, USA og John E. Walker, Cambridge, England.